畜牧人
標(biāo)題:
求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法
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作者:
lglucky
時間:
2012-8-20 14:52
標(biāo)題:
求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法
如題,求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法。
有誰在檢測這個項目的,請將檢測方法和相應(yīng)的試劑、儀器分享下,先行謝過了!
作者:
山中的漫游者
時間:
2012-8-21 11:21
這個有國標(biāo)的阿
作者:
aoxuechenfeng
時間:
2012-8-21 14:04
sdfda
作者:
默問
時間:
2012-8-21 14:37
漂過
作者:
蒙培慧
時間:
2012-8-22 08:32
α糊化度的測定
目前,α化度的測量方法有雙折射法、膨脹法、染料吸收法、酶水解法、粘度測量法及淀粉透明度測量法等。不同的測定方法。得到的α化度值會有相當(dāng)大的差異,這是由于測定基礎(chǔ)和基準(zhǔn)等不同,產(chǎn)生差異是必然的。當(dāng)前比較公認(rèn)的方法是酶法,其次是染料吸收法中的碘電流滴定法。酶法又分為淀粉糖化酶法、葡萄糖淀粉酶法及β-淀粉酶法等,其基本原理都是利用各種酶對糊化淀粉和原淀粉有選擇性的分解,通過對生成物的測量得到準(zhǔn)確的α化度。 (一) 葡萄糖淀粉酶法 通常,糊化淀粉容易被淀粉酶消化,因此可用消化相對百分 率來準(zhǔn)確計算α化度。 1. 儀器與試劑 攪拌器,玻璃均質(zhì)器,1~2ml移液管,恒溫水浴,臺式離心機。99%乙醇,2mol/L醋酸緩沖液(PH4.8),10mol/L氫氧化鈉,2mol/L醋酸,2.6 3u/ml葡萄糖淀粉酶液,0.025mol/L鹽酸。 2. 測定步驟 試樣的調(diào)制:試樣 20g(或 20ml),加入 200ml 99%的乙醇,投入高速旋轉(zhuǎn)的家用混合器中連續(xù)旋轉(zhuǎn) 1min,使之迅速脫水。生成的沉淀用 3號玻璃過濾器抽濾,用約50m199%的乙醇,接著用50ml乙醚脫水干燥后,放在氯化鈣干燥器中,以水力抽濾泵減壓干燥過夜,用研缽將其輕輕粉碎,仍保存在同樣的干燥器中備用。 操作:將100mg上述的干燥試料放入磨砂配合的玻璃均質(zhì)器中,加8ml蒸餾水,用振動式攪拌機攪拌至基本上均勻為止。接著將均質(zhì)器上下反復(fù)幾次,使之成為均勻的懸浮液。再用振動式攪拌機均勻化,隨即各取懸浮液2ml注入2只容量為20ml的試管中,分別用作被檢液和完全α化檢液。向被檢液試管加 2mol/L醋酸緩沖液(pH4.8) 1.6ml和水0.4ml,而往完全α化檢液試管添加 10mol/LNaOH溶液0.2ml,在證實已于室溫下完全溶解之后,加2mol/L醋酸 1.6ml(醋酸的添加量需預(yù)先通過試驗決定,其量為使pH調(diào)至4.8時所用的醋酸量)。最后加水使容量為4ml。將這2只試管放在37℃的恒溫槽中預(yù)保溫數(shù)分鐘后,添加酶液lml(2.63u),每隔10~15min振蕩一次,共反應(yīng)60min。然后,得反應(yīng)液 0.5ml加入預(yù)先放有10ml 0.025mol/L鹽酸(起停止反應(yīng)的作用)的錐底離心管中,上下振蕩數(shù)次,在轉(zhuǎn)速為3000r/min的離心機中分離10min。取上層清液0.5m1,用蒸餾水稀釋1倍,用Somogyi-Nelson法(見后)或適當(dāng)?shù)姆椒ǘ窟€原精,并從下式求出α化度: 市售的玻璃均質(zhì)器磨砂配合是硬性的配合,需用150或400目的金剛砂來調(diào)節(jié)配合。均質(zhì)器的配合,以在干燥狀態(tài)下磨砂配合棒能緩慢地自然落下者為好。葡萄糖淀粉酶用的是內(nèi)孢霉或黑曲霉的粗酶。酶活力以在pH4.8的醋酸緩沖液(0.2mol/L)中,在37℃能將0.2%的可溶性淀粉生成1μg分子葡萄糖的酶量作為1個單位(U)。 (二)Somogyi~Nelson法 試劑:25g無水碳酸鈉,25g酒石酸鉀鈉,20g碳酸氫鈉,200g無水硫酸鈉加入800ml水中,使之溶解并定容成 1L。必要時則需過濾。 B.30g結(jié)晶硫酸鈉(CuSO4·5H2O)溶于200ml含4滴濃硫酸的水中。 C.25g鉬酸銨溶于 450ml預(yù)先添加 21ml濃硫酸的水中。 3g砷酸氫二鈉(Na2HAsO4·7H2O)溶解于25ml水中,并將此溶液慢慢地加入不斷攪拌下的上述水溶液中,然后稀釋至500ml。將此溶液置于55℃水浴上小心保溫30min,或在37℃放置過夜。 取上述經(jīng)酶液處理過的完全α化的檢液和被檢液各0.5ml,分別用蒸餾水稀釋 l倍后,加到新配制的 1.0mlD液中,( 1.0mlB波加到25mlA液中)總?cè)莘e為2.0ml。混合液在沸水中放置20min,接著用冷的流水冷卻5min,然后加入1.0mlC試劑,使其充分混合,直到混合液已不放出CO2氣為止。靜置10min后,用水稀釋至25ml。用裝上綠色濾光片的比色計測定,或用分光光度計測定520nrn波長處的光密度。用麥芽糖作標(biāo)準(zhǔn)曲線,參比溶液為 lml經(jīng)均質(zhì)器攪拌均勻后的試樣溶液加 lml0.04mol緩沖溶液及2ml水的混合液。 (三)碘電流滴定法 糊化淀粉能與碘結(jié)合成螺旋狀復(fù)合物,生淀粉則不能。此法就是將試樣在懸浮液和完全α化的溶液狀態(tài),通過電流滴定法測定碘的結(jié)合量,從兩者之比來求糊化度的方法 1. 儀器與試劑 攪拌器,玻璃均質(zhì)器,10ml移液管,恒溫水浴,滴定管,電流計。 99%乙醇,乙醚; lmol/L HCI,0.5mol/L KOH, 0.4mol/L KI, 0.001 mol/L 。 2. 測定步驟 精確稱取試樣淀粉30mg(直鏈淀粉用5.0mg),放入玻璃制磨砂配合的手動均質(zhì)器中,加水 10ml,使之充分分散(約往復(fù) 20次)。在分散液里加 lmol/L HCl 10ml與 0.5mol/L KOH 10ml的混合液,以及 0.4mol/L KI 5ml,并加水定容為 100ml。將此混合液移入滴定用的帶夾套的燒杯里,在20~30℃的溫度范圍內(nèi),用0.001mol/L KIO3溶液滴定。每滴加 0.2ml,經(jīng) 2min后讀取電流值,將它對應(yīng)于滴定值作圖,求得碘結(jié)合量。試樣測定時,先將它完全溶解在 10ml 0.5mol/L的KOH中,然后加 10ml HCI與5ml 0.4mol/L KI,再加水定容成100ml,以后的滴定操作同上。 本方法對于直鏈淀粉是專一的。
作者:
蒙培慧
時間:
2012-8-22 08:34
復(fù)制上去怎么出現(xiàn)那么多亂碼呀?
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