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發(fā)表于 2013-8-17 19:46:06
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小人物 發(fā)表于 2013-8-16 09:00 
目前的抗體檢測(cè)試劑盒沒(méi)有辦法定量檢測(cè),也沒(méi)有辦法區(qū)分疫苗和野毒的抗體,單一依靠抗體水平高低也無(wú)法證 ...
豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
日期: 2011-04-02 14:02 來(lái)源:瑞普生物 查看:次我要評(píng)論手機(jī)看新聞
【獸藥名稱】
通 用 名:豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒
商 品 名:銳捷
英 文 名:Porcine circovirus 2-dCap antibody ELISA kit
漢語(yǔ)拼音:Zhu Yuanhuan Bingdu 2-dCap-ELISA Kangti Jiance Shijihe
【主要成分與含量】本品系由大腸桿菌基因工程菌BL21-dCap表達(dá)的豬圓環(huán)病毒2型去核定位信號(hào)衣殼蛋白為抗原的抗原包被板、待檢樣品稀釋板、封板膜、強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照血清、弱陽(yáng)性對(duì)照血清、陰性對(duì)照血清、山羊抗豬IgG酶標(biāo)二抗工作液、20x洗滌濃縮液(血清稀釋液)、顯色A液、顯色B液、終止液等成分組成。
【作用與用途】 用于豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白抗體檢測(cè)。
【用法與用量】
1 用法
1.1 取20x濃縮洗滌液(血清稀釋液),用蒸餾水稀釋20倍。
1.2 用血清稀釋液在稀釋板內(nèi)將待檢血清樣本稀釋400倍,振蕩混勻。
1.3 取抗原包被板,每個(gè)待檢樣品選取2孔,每孔加入100μl已稀釋的待檢樣品;同時(shí)設(shè)不稀釋的強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照血清孔、弱陽(yáng)性對(duì)照血清孔、陰性對(duì)照血清孔,各2孔,毎孔100μl。
1.4 輕輕振勻孔中樣品,置37℃ 孵育30分鐘。
1.5 甩掉抗原包被板孔中的溶液,每孔加入200~300μl洗滌液,靜置1分鐘,倒掉洗滌液。重復(fù)洗板5次。吸水紙干燥抗原包被板。
1.6 每孔加入山羊抗豬IgG酶標(biāo)二抗工作液100μl,置37℃孵育30分鐘。
1.7 洗滌液洗板5次,方法同1.5。
1.8 蒸餾水洗板2次,甩干。
1.9 等體積混合顯色A液、顯色B液,混勻,每孔100μl,室溫避光顯色10分鐘。
1.10 每孔加終止液50μl,15分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。
1.11 在酶標(biāo)儀上讀取樣品OD450nm的光密度值。
2 判定
2.1 試驗(yàn)成立條件 兩孔陰性對(duì)照OD450nm平均值應(yīng)≤0.25,兩孔強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照OD450nm平均值應(yīng)≥0.8,兩孔弱陽(yáng)性對(duì)照OD450nm平均值應(yīng)≥0.5。
2.2 S/P值的計(jì)算
S/P值=(待檢樣本OD450nm均值-陰性對(duì)照OD450nm均值)/(強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照OD450nm均值-陰性對(duì)照OD450nm均值)。
2.3 結(jié)果判定
陽(yáng)性 S/P值≥0.25。
可疑 0.16<S/P值<0.25。
陰性 S/P值≤0.16。
(注:可疑區(qū)間的樣品重復(fù)檢測(cè)一次,如樣品S/P值仍在可疑區(qū)間內(nèi),判定為PCV-2抗體陰性。)
【注意事項(xiàng)】
1.試劑盒嚴(yán)禁凍結(jié)。
2.試劑盒的洗液出現(xiàn)絮狀沉淀不能使用。
3. 96孔抗原包被板受潮或沾水后不能使用。
4.顯色A液、顯色B液切勿交叉污染。
5.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出后,應(yīng)置室溫下平衡30分鐘后再使用。
6.每個(gè)血清樣品1個(gè)吸頭,避免樣品交叉污染。
7.待檢血清樣品數(shù)量較多時(shí),應(yīng)盡量縮短加樣時(shí)間。
8.洗滌時(shí)各孔均需加滿洗滌液,防止因洗滌不充分造成非特異性顯色。
9.終止反應(yīng)后應(yīng)立即用酶標(biāo)儀讀數(shù),應(yīng)在15分鐘內(nèi)完成。
10.所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)滅活處理。
11.所有試劑均含有防腐劑,不得入口。
12.顯色B液對(duì)強(qiáng)光和氧化劑敏感,應(yīng)盡量避光;取顯色A液、顯色B液時(shí)必須更換槍頭,防止試劑交叉污染。
13.終止液為2mol/L硫酸,應(yīng)避免與眼睛、皮膚接觸。
14.嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)操作步驟操作。
【規(guī)格】 192孔/盒,90頭份。
【貯藏與保存期】 2~8℃保存,有效期為6個(gè)月。
【批準(zhǔn)文號(hào)】獸藥生字(2010)030388095
【生產(chǎn)企業(yè)】瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司 郵編:071000
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