(一)乳脂率的計(jì)算方法
常規(guī)的乳脂率測(cè)定方法,是在全泌乳期的10個(gè)泌乳月內(nèi),每月測(cè)定1次,將測(cè)定的數(shù)據(jù)分別乘以各該月的實(shí)際產(chǎn)乳量,而后將所得的乘積累加起來(lái),被總產(chǎn)乳量來(lái)除,即得平均乳脂率。乳脂率用百分率表示,計(jì)算公式是:
∑(F×M)
平均乳脂率=————————
∑ M
式中,∑為累計(jì)的總和,F為每次測(cè)定的含脂率,M為該次取樣期的產(chǎn)乳量。
由于乳脂率測(cè)定工作量較大,為了簡(jiǎn)化手續(xù),近年中國(guó)奶牛協(xié)會(huì)提出3次測(cè)定法來(lái)計(jì)算其平均乳脂率,即在全泌乳期中的第2、第5和第8泌乳月內(nèi)各測(cè)1次,而后應(yīng)用上列公式計(jì)算其平均乳脂率。從北京市北郊農(nóng)場(chǎng)對(duì)1 635個(gè)泌乳期的資料分析結(jié)果證明,采用二、五、八月測(cè)定的平均乳脂率和每月測(cè)定一次的平均乳脂率之間差異極小,僅為0.012%,差異不顯著。
(二)乳脂率的測(cè)定方法
實(shí)驗(yàn)室測(cè)定乳脂率常用的方法有巴氏法和蓋氏法兩種。這兩種方法的基本原理相同,只是所用儀器、試劑和硫酸量有所差異。
1.乳脂率測(cè)定的原理
乳是一種復(fù)合體,含有水分、乳脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖和礦物質(zhì)等成分。組成乳的這些物質(zhì)有著不同的分散度,其中乳糖和大部分鹽類(lèi)呈溶解狀態(tài)而溶于水溶液中;乳脂肪呈很小的脂肪球,散布在乳的水溶液中,呈乳濁液狀態(tài);乳蛋白質(zhì)則以更小的顆粒散布于乳的水溶液中,呈乳膠狀態(tài),從而使乳中的脂肪球能穩(wěn)定地存在而不相互合并。
要分離出乳中的脂肪,必須破壞乳的乳膠狀態(tài)。因此,在乳中加入濃硫酸或堿液,就可將乳脂肪以外的物質(zhì),特別是蛋白質(zhì)溶解,生成可溶性干酪素硫酸絡(luò)鹽,使脂肪球的安定性降低,然后在離心機(jī)上分離,就可以把乳脂肪分離出來(lái)。同時(shí),乳脂肪的密度為0.9,加硫酸后,使脂肪以外的液體比重提高到1.43,使乳脂肪更易上浮。
2.測(cè)定方法
(1)巴氏(Babcock)法
先將乳樣加熱至10~20℃,用吸乳管把乳樣充分?jǐn)噭?,然后在其中部吸?/font>17.6ml乳樣,注入試驗(yàn)瓶中;注入時(shí)試驗(yàn)瓶應(yīng)稍?xún)A斜,吸乳管不能全部插入瓶口。用量酸器量取密度為1.82—1.83的硫酸17.5ml(溫度在20℃),沿瓶?jī)?nèi)壁徐徐加入于巴氏試驗(yàn)瓶中,并用手指微微轉(zhuǎn)動(dòng)試驗(yàn)瓶,讓硫酸把瓶口上的乳汁沖洗入瓶?jī)?nèi)。硫酸須分幾次加入,每次加入少量硫酸后,輕輕搖動(dòng)試驗(yàn)瓶,使已經(jīng)結(jié)塊的凝乳全部溶解,直到硫酸完全加入瓶?jī)?nèi)為止。加酸完畢,以手指持試驗(yàn)瓶頸部作長(zhǎng)圓形的方向搖動(dòng),使硫酸與乳汁混合均勻,充分發(fā)生作用。當(dāng)呈現(xiàn)咖啡色或櫻桃紅色時(shí),表現(xiàn)蛋白質(zhì)已全部溶解,就可停止旋轉(zhuǎn)。然后將試驗(yàn)瓶放人離心機(jī)內(nèi)以每分鐘100轉(zhuǎn)的速度旋轉(zhuǎn)5min(在冬季如試驗(yàn)瓶?jī)?nèi)容物已冷卻,或者不能立即分離時(shí),在分離前須置于水浴槽內(nèi),使水溫保持在60~70℃,經(jīng)15~20min)。分離畢取出試驗(yàn)瓶,用60—70℃蒸餾水沿瓶頸內(nèi)壁徐徐加入達(dá)瓶頸的基部為止,放入離心機(jī)再旋轉(zhuǎn)2min。分離畢取出試驗(yàn)瓶,再加入60—70℃蒸餾水,使脂肪柱上升達(dá)瓶頸第5~6格為限,放人離心機(jī)再旋轉(zhuǎn)lmin。最后取出試驗(yàn)瓶,浸于60—70℃的水浴槽中,水的深度與脂肪柱的上端取平,約經(jīng)1~2min后取出,用兩腳規(guī)以一腳指向脂肪底的水平面,另一腳指向脂肪柱的頂點(diǎn),再?gòu)钠湎乱稽c(diǎn)移至“0”刻度上,由上一點(diǎn)即可讀出脂肪率的百分率。
(2)蓋氏(Gerber)法
樣乳處理與巴氏法相同。用量酸器量取密度為1.82~1.83的硫酸10ml,加入蓋氏試驗(yàn)瓶?jī)?nèi)。用吸乳管攪勻樣乳后,吸取1lml徐徐注入試驗(yàn)瓶中。用精細(xì)吸管吸取lml異戊醇注入試驗(yàn)瓶?jī)?nèi)。蓋好試驗(yàn)瓶的塞子,上下振蕩,使蛋白質(zhì)充分溶解。將試驗(yàn)瓶放入65—70℃水浴槽中,保持3~5min。然后將試驗(yàn)瓶放人離心機(jī)的金屬筒內(nèi)(尖頭向離心機(jī)的中央),蓋好后以每分鐘100次的速度旋轉(zhuǎn)5min。分離畢取出試驗(yàn)瓶,放人65~70℃的水浴槽中浸3~5min(浸時(shí)粗頭向下)。取出試驗(yàn)瓶,讀取脂肪百分?jǐn)?shù),讀時(shí)先旋轉(zhuǎn)橡皮塞,使脂肪柱下端調(diào)整到“0”刻度上。
3.測(cè)定時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)
(1)測(cè)定每頭牛的乳脂率時(shí),必須取全天的混合牛奶。用吸乳管吸取乳樣時(shí),必須充分?jǐn)噭蚝笤傥?,否則會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
(2)硫酸的濃度必須是在15C時(shí)密度為1.82~1.83。濃度過(guò)高或過(guò)低,以及加酸量過(guò)多或不足,均將影響測(cè)定結(jié)果。一般市售硫酸,比重多為1.84,因此必須按下列公式
加以調(diào)整:
硫酸密度:1.84 1.830 1.820 1.815
硫酸濃度:96% 92% 90% 89%
(184+X):176.94=100:91
X=10ml
即密度為1.84的硫酸100ml稀釋為1.825H2S04需加入的水量為10ml。
式中:184——濃硫酸重量;
X——應(yīng)加入的水量;
176.94——密度1.84即濃度96%的硫酸100ml,其重量為184g,而其所含硫
酸則為176.94g(184×96/100=176.94);
91——所需硫酸的濃度。
(3)加酸時(shí)要小心謹(jǐn)慎,以防硫酸倒在桌上、衣服或手上而受腐蝕。硫酸瓶或試驗(yàn)瓶用后必須放在瓷盤(pán)內(nèi)。
(4)離心分離時(shí),試驗(yàn)瓶要對(duì)稱(chēng)地放在離心機(jī)內(nèi)。旋轉(zhuǎn)離心機(jī)時(shí),應(yīng)由慢而快,到達(dá)規(guī)定速度時(shí),要始終保持速率均衡。在停止離心分離時(shí),要逐漸減慢速度,以免損壞機(jī)件和試驗(yàn)瓶。
(5)吸乳管每次用后應(yīng)立即沖洗干凈。測(cè)定結(jié)束后,應(yīng)將所用儀器逐一洗凈,先用35℃溫水充分沖洗后,再用55℃、濃度為0.5%的熱堿水刷洗,最后用溫水沖洗干凈。
上述巴氏法和蓋氏法手續(xù)繁瑣,效率低,不利于大量樣品的分析。隨著電子工業(yè)的發(fā)展,近年國(guó)際上已出現(xiàn)利用現(xiàn)代化儀器的分析方法,如英國(guó)生產(chǎn)的伊爾麥紅外線(xiàn)牛奶分析儀,分大、小兩種型號(hào),小型可供實(shí)驗(yàn)室用,大型可供牛奶場(chǎng)及育種組織或乳品分析中心使用。此項(xiàng)設(shè)備不僅能測(cè)定乳脂肪的含量,而且可同時(shí)測(cè)定蛋白質(zhì)、乳糖和總干物質(zhì)的含量。前者是手工操作,每件樣品測(cè)定以上4種指標(biāo)約需lmin,而后者是全部自動(dòng)化操作,每小時(shí)可分析260件樣品,并可將結(jié)果以數(shù)字顯示或記錄于紙上。這種牛奶分析儀我國(guó)已
進(jìn)口并試制,但使用尚不普遍。 |
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