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~$色譜法(建議仲裁法).doc
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離子色譜法(建議仲裁法)
1 范圍
本方法適用于固體、液體、吸附型、復合型甜菜堿產品及預混料中甜菜堿含量的檢測。
2 原理
甜菜堿和氯化膽堿都屬于季氨型生物堿,因具有相似于堿金屬離子的交換行為,故可采用陽離子色譜分離、非抑制電導檢測法檢測。
3 主要試劑
甜菜堿標準儲備液:1mg/ mL;甜菜堿標準工作液:10ug/mL
淋洗液儲備液:400mMHCLO4高氯酸 ,250mM乙二胺—100mMHNO3,用醋酸調至PH4.5;淋洗液:4mMHCLO4高氯酸;
4 主要設備
離子色譜儀
5 測定步驟
5.1待測液制備:
準確稱取吸附型甜菜堿試樣1.0000克于離心管中加水50毫升, 超聲振蕩3~4分鐘后,以每分鐘4000轉離心10分鐘,過濾浸提液備用;取適量固體或液體試樣溶解或稀釋定容100mL備用。分取適量待測液用淋洗液定容至一定體積。取適量樣液用0.45uM微膜過濾,注射進樣。
5.2主要色譜條件:
色譜儀:泵,電導檢測器,數據處理軟件。
色譜柱:陽離子交換柱 250 X 4.6mm PEEK
非抑制型電導檢測器, 10uL流通池,具電抑制能力≥5000uS
進樣體積:100uL
淋洗液: 4mM HCIO4
流速:1.5 mL/min
6 結果計算
6.1計算公式:
C ╳ V ╳ N
甜菜堿(%)=------------------------
m
式中: C ─ 上機液濃度,ug/mL;
V ─ 待測液體積,mL;
N ─ 稀釋倍數;
m ─ 試樣的質量,g。
6.2 允許差
兩個平行樣測定結果相對偏差不大于2 %。 |
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