1.4.5酶活力計算 將反應完的溶液在室溫下靜置10 min達澄清后在分光光度計415 nm波長處測定樣品空白的吸光值和樣品溶液的吸光值。 其原理是利用植酸酶水解植酸鹽釋放無機磷,通過加入酸性鉬-釩試劑,使水解反應停止,同時與水解釋放出來的無機磷產(chǎn)生顏色反應,形成黃色的釩鉬磷絡(luò)合物,在波長415 nm下進行比色測定磷的含量。以標準磷溶液(或標準植酸酶)為參照,計算酶活力。 酶活力計算公式:U=F×C/30m式中:U——試樣中植酸酶的活性(U/g);C——根據(jù)實際樣液的吸光值由直線回歸方程計算出的磷濃度;F——試樣溶液反應前的總稀釋倍數(shù);m——試樣質(zhì)量(g);30——反應時間(min)。 以相應不加熱的酶活力作對照(100%),測定植酸酶活力保留率。 酶活力保留率(%)=(加熱后酶活/不加熱的原酶活性)×100%=(85 ℃后反應得到的OD415/不加熱原酶樣反應后得到的OD415)×100%以不加海藻糖的酶活力保留率為對比,比較海藻糖對植酸酶熱穩(wěn)定性的影響。根據(jù)公式計算酶活力。 2 數(shù)據(jù)計算與結(jié)果分析 2.1 數(shù)據(jù)計算(見表4)C1=(0.170-0.035)/0.035=3.857,U1=6 000×3.857/30=771.4;C2=(0.058-0.035)/0.035=0.657,U2=6 000×0.657/30=131.4;C3=(0.103-0.035)/0.035=1.943,U3=6 000×1.943/30=388.6;C4=(0.112-0.035)/0.035=2.2,U4=6 000×2.2/30=440;C5=(0.126-0.035)/0.035=2.6,U5=6 000×2.6/30=520。 酶活保留率U'2=(U2/U1)×100%=(131.4/771.4)×100=17.1%;酶活保留率U'3=(U3/U1)×100%=(388.6/771.4)×100=53.4%;酶活保留率U'4=(U4/U1)×100%=(440/771.4)×100=57.1%;酶活保留率U'5=(U5/U1)×100%=(520/771.4)×100=67.4%。 |
畜牧人
畜牧人養(yǎng)豬
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