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海藻糖對植酸酶熱穩(wěn)定性的影響研究

apple12151007 2011-1-24 14:36

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簡介

海藻糖（Trehalose）又名繭蜜糖、蘑菇糖、漏蘆糖或簟糖，是在動物、植物、微生物中廣泛分布的一種低聚糖，當(dāng)生物處于逆境時，其含量增加，是一種典型的應(yīng)激代謝產(chǎn)物。

　　2.2 結(jié)果分析

　　添加不同量的海藻糖對植酸酶熱穩(wěn)定性的影響(見圖2)

　　從圖2可見，植酸酶溶液中加入等體積的海藻糖溶液,85 ℃處理5 min后均能提高在高溫下的熱穩(wěn)定性，加入40、60和80 mg海藻糖的植酸酶其酶活保留率分別達(dá)到了53.4%、57.1%和67.4%，較原酶活保留率17.1%分別提高了36.3、40、50.3個百分點(diǎn)。添加80 mg海藻糖對植酸酶的熱穩(wěn)定性提高效果最好。

　　3 討論

　　3.1 研究進(jìn)展酶的穩(wěn)定性一直是困擾其大規(guī)模應(yīng)用的主要原因。為了保持酶的活力，國內(nèi)外大多采用在濃縮液中加入金屬離子、多元醇、多糖類化合物等方法。海藻糖作為一種多醇化合物，既可通過氫健與酶蛋白表面分子相連結(jié)，也能通過氫健有效地與外部水分子相連結(jié)，使酶蛋白分子穩(wěn)定。本試驗(yàn)在植酸酶中加入不同質(zhì)量的海藻糖均能提高商品植酸酶在高溫下的熱穩(wěn)定性，其中以80 mg海藻糖的效果最好。其在生產(chǎn)中的應(yīng)用如何尚需作進(jìn)一步的研究。

　　隨著基因工程與蛋白質(zhì)工程技術(shù)的發(fā)展，定點(diǎn)突變、同序方法和定向進(jìn)化技術(shù)將逐漸應(yīng)用于酶的熱穩(wěn)定性研究。在分子水平上對植酸酶基因進(jìn)行改造，使植酸酶本身就具有良好的熱穩(wěn)定性無疑是很有意義的。

　　3.2 影響試驗(yàn)效果的其它因素

　　在試驗(yàn)過程中由于試驗(yàn)條件和試驗(yàn)環(huán)境的限制，試驗(yàn)結(jié)果受諸多因素的影響，其影響因素除了pH值、溫度、濕度、作用時間、抑制劑、激活劑、底物和產(chǎn)物濃度，以及植酸、植酸酶來源等外，還表現(xiàn)在以下幾個方面:① 植酸酶的活性會因放置時間的加長而使其活性降低，故其酶活力保留率也會隨之降低。② 試驗(yàn)水浴溫度不太穩(wěn)定時有變化，從而使試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。

　　4 結(jié)論

　　本試驗(yàn)采用絕對法對不同濃度的海藻糖對植酸酶熱穩(wěn)定性的影響進(jìn)行研究，結(jié)果表明添加80 mg海藻糖對植酸酶的熱穩(wěn)定性提高效果最好，酶活力保留率提高了50.3個百分點(diǎn)。在植酸酶液中加入海藻糖比不加時酶活力保留率提高36.3~50.3個百分點(diǎn)。

　?。▍⒖嘉墨I(xiàn)20篇，刊略，需者可函索）（編輯：沈桂宇，guiyush@126.com）李融，天津農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)系，300384，天津。

　　蘇琰(通訊作者)，揚(yáng)州大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院。

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